Среди многообразия методов клинической лабораторной диагностики, метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) широко используется в клинической лабораторной диагностике и практической практике.

Принцип метода ПЦР был разработан Кэри Мюлисом (фирма «Cetus», США) в 1983г. и в настоящее время широко используется в практическом здравоохранении в США, Японии и странах Европейского союза.

В основе метода ПЦР лежит комплементарное достраивание ДНК матрицы, осуществляемое in vitro с помощью ДНК-полимеразы.

Контингенты лиц, которые подлежат исследованию на ПЦР согласно рекомендациям ВОЗ

  • Хронические воспалительные заболевания мочеполовой системы
  • Наличие ИППП
  • Акушерско-гинекологическая патология
  • Беременность
  • Псевдоэрозия шейки матки и др.
  • Реактивный артрит
  • Хронический коньюктивит
  • Атипичная пневмония
  • Лихорадка неясного генеза
  • Нарушения менструального цикла
  • Самопроизвольные и искусственные аборты
  • Лечебные и диагностические выскабливания слизистой оболочки шейки матки и тела матки
  • Введение и удаление внутриматочных контрацептивов и другие внутриматочные вмешательства
  • Хронический цистит
  • Патология периода новорожденности
  • Половые контакты с лицами, страдающими ИППП
  • Частая смена половых партнеров

 

Преимущества метода ПЦР

Прямое определение наличия возбудителей

Многие традиционные методы диагностик, например, иммуноферментный анализ, выявляют белки-маркеры, являющиеся продуктами жизнедеятельности инфекционных агентов, что дает лишь опосредованное свидетельство наличия возбудителя. Выявление специфического участка ДНК возбудителя методом ПЦР дает прямое указание на присутствие возбудителя инфекции.

Высокая специфичность

Высокая специфичность метода ПЦР обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется уникальный, характерный только для данного вида возбудителя фрагмент ДНК. Это исключает возможность получения ложных результатов, в отличие от метода иммуноферментного анализа, где нередки ошибки в связи с перекрестно-реагирующими антигенами.

Высокая чувствительность

Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно. Чувствительность ПЦР-анализа составляет 10 клеток в пробе (чувствительность иммунологических и микроскопических тестов – 1000 – 100000 клеток).

Уникальность процедуры выявления различных возбудителей

Материалом для исследования методом ПЦР служит ДНК возбудителя. Метод основан на выявлении фрагмента ДНК или РНК, являющегося специфическим только для конкретного организма. Это дает возможность диагностировать несколько возбудителей из одной биопробы. В качестве исследуемого материала могут использоваться различные биологические выделения (слизь, моча, мокрота), соскобы эпителиальных клеток, кровь, сыворотка.

Высокая скорость получения анализа

Для проведения ПЦР-анализа не требуется выделение и выращивание культуры возбудителя, что занимает длительный период времени. Унифицированный метод обработки биоматериала и детекции продуктов реакции, автоматизация процесса амплификации дают возможность провести полный анализ за 24 часа.

Возможность диагностики не только острых, но и латентных инфекций

Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и перстистирующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, с выращиваем таких микроорганизмов в лабораторных условиях.

Наиболее эффективно и экономически обоснованно использование метода в урогенитальной практике – для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса 1,2 типов, гарднереллеза, микоплазменной инфекции; в гастроэнтерологии – для выявления геликобактериоза, в клинике инфекционных заболеваний – парантеральных гепатитов В, С, онковирусов.

ПЦР применяется также определения устойчивости возбудителей к современным антибактериальным препаратам и для контроля эффективности проведенного лечения.